人原代軟骨原代細胞
細胞培養(yǎng)操作：
收貨處理取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)
傳代密度細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)
傳代代數可傳5代左右；3代以內狀態(tài)
傳代比例傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法：
1.吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4.待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。
商品屬性：
規(guī)格 | 5x105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 貨號 | EY-XY3366 |
種屬來源 | 人 | 組織來源 | 關節(jié) |
生長特性 | 貼壁生長 | 形態(tài)特征 | 長梭形細胞，不規(guī)則細胞 |
形態(tài)：長梭形細胞，不規(guī)則細胞
培養(yǎng)基：人軟骨細胞專業(yè)培養(yǎng)基
培養(yǎng)環(huán)境：氣相：95%空氣+5%二氧化碳;溫度：37℃
傳代特征：可傳5代左右；3代以內狀態(tài)
細胞基本屬性：
種屬來源：人
組織來源：關節(jié)關節(jié)
生長特性：貼壁生長
產品規(guī)格：5x105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
換液頻率：每2-3天換液一次
消化液：0.25%胰蛋bai酶
產品貨期：7-8周左右
運輸方式：T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞（包郵）
供應限制：僅限于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用
背景介紹：:人軟骨細胞采用膠原酶-中性蛋bai酶聯(lián)合消化制備而來，人軟骨細胞分離自軟骨組織；軟骨組織由軟骨細胞、基質及纖維構成。軟骨組織再生能力強，這些增生的幼稚細胞形似纖維母細胞，以后逐漸變?yōu)檐浌悄讣毎⑿纬绍浌腔|，細胞被埋在軟骨陷窩內而變?yōu)殪o止的軟骨細胞。根據軟骨組織內所含纖維成分的不同，可將軟骨分為透明軟骨、彈性軟骨和纖維軟骨三種，其中以透明軟骨的分布較廣，結構也較典型。軟骨細胞（chondrocyte）位于軟骨陷窩內。幼稚的軟骨細胞位于軟骨組織的表層，單個分布，體積較小，呈橢圓形，長軸與軟骨表面平行，越向深層的軟骨細胞體積之間增大呈圓形，細胞核圓形或卵圓形，染色淺，細胞質弱嗜堿性，常見數量不一的脂滴。成熟的軟骨細胞多2-8個成群分布于軟骨陷窩內，這些軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成，稱為同源細胞群。電鏡下，軟骨細胞有突起和皺褶，細胞質內有大量的粗面內質網和發(fā)達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中，軟骨細胞收縮為不規(guī)則形，在軟骨囊和細胞之間出現較大的腔隙。體外培養(yǎng)的軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
原代細胞培養(yǎng)的主要步驟包括：
?一、剝離組織，去除外膜、結締組織等?：將組織從動物體中取出，并去除可能存在的外膜或結締組織等雜質。
二、?洗滌后將組織剪成1mm左右的小塊?：使用生理鹽水或其他適當的緩沖液洗滌組織，然后將其剪成約1mm大小的小塊。
三、?用0.1%～0.2%的消化?：將剪碎的組織塊加入含有0.1%～0.2%的緩沖液中，進行消化。消化時間可根據具體實驗需求選擇熱消化（37℃）或冷消化（4℃），熱消化時間短，冷消化時間長但條件更溫和。
?四、吹打分散后，過濾、計數?：將消化后的細胞吹打到一個離心管中，然后過濾、計數。
五、?按30萬/毫升分瓶培養(yǎng)?：將計數后的細胞按30萬/毫升的濃度分瓶培養(yǎng)。
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