本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測小鼠血清、血漿、組織勻漿及細胞上清液中的肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)蛋白濃度。檢測范圍覆蓋0.313-20 ng/mL,靈敏度達0.16 ng/mL,適用于肺部發(fā)育、呼吸功能及肺部疾病研究等領(lǐng)域。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白Belisa試劑盒 | 英文名稱 | SP-B ELISA Kit |
貨號 | CS-1129E | 規(guī)格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 僅供科研實驗 |
核心原理:

固相化:微孔板預先包被抗小鼠SP-B抗體。
結(jié)合:加入標準品或樣本,SP-B被固相抗體捕獲。
檢測:加入純化的抗小鼠SP-B抗體和HRP標記的親和素,形成"抗體-抗原-酶標抗體"復合物。
顯色:加入TMB底物,被HRP催化后由藍色變?yōu)辄S色。
測定:用酶標儀在450nm波長測定吸光度(OD值),濃度與OD值成正比。
樣本要求:

1. 樣本處理
1) 血清:無菌無熱源采血管采集,避免溶血 / 脂血;1000×g 離心 10 min 取上清,-20℃分裝,禁反復凍融。
2) 血漿:EDTA / 檸檬酸鹽抗凝(慎用肝素),離心分離上清。
3) 細胞上清:1000×g 離心除碎片,-70~-80℃保存。
4) 組織勻漿:預冷 PBS / 生理鹽水冰上勻漿,高速離心取清亮上清低溫保存。
2. 通用注意
嚴禁加NaN3抑制 HRP 活性;杜絕溶血、渾濁、污染樣本;全程低溫防降解;超標樣本用試劑盒專用稀釋液稀釋,實驗建議設置復孔。
操作步驟:

1.試劑提前室溫平衡 30 min,濃縮洗滌液按說明書稀釋配制。
2.設置空白孔、標準品孔、待測樣品孔,精準加樣后封板。
3.37℃恒溫孵育結(jié)合反應,結(jié)束后棄孔內(nèi)液體拍干。
4.加滿洗滌液浸泡清洗,重復洗板 3–5 次,去除未結(jié)合雜質(zhì)。
5.除空白孔外,每孔加入 HRP 酶結(jié)合物,再次 37℃溫育。
6.重復洗板流程洗凈游離酶標抗體,保證背景干凈。
7.依次加入顯色液避光顯色,待梯度藍色清晰顯現(xiàn)。
8.加入終止液終止反應,顏色由藍轉(zhuǎn)黃,即刻用酶標儀讀取 OD 值。
9.根據(jù)標準曲線擬合計算,得出樣本目標物質(zhì)濃度。
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