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產(chǎn)品簡介：

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測小鼠血清、血漿、腸道組織勻漿中的腸脂肪酸結(jié)合蛋白（iFABP）蛋白濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達(dá) 0.16 ng/mL，適用于腸黏膜損傷、腸道屏障功能、脂肪吸收及胃腸疾病研究等領(lǐng)域。

產(chǎn)品名稱：小鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)elisa試劑盒

英文名稱：iFABP ELISA Kit

產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T

產(chǎn)品貨號(hào)：CS-1194E

檢測原理：

小鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白 (iFABP) elisa 試劑盒的原理是雙抗體夾心法，通過固相載體捕獲抗原，再用酶標(biāo)記的檢測抗體進(jìn)行識(shí)別，最后通過底物顯色反應(yīng)來定量檢測。

固相化：微孔板預(yù)先包被抗小鼠 iFABP 抗體。

結(jié)合：加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，iFABP 被固相抗體捕獲。

檢測：加入生物su化的抗小鼠 iFABP 抗體和 HRP 標(biāo)記的親和素，形成 "抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體" 復(fù)合物。

顯色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化后由藍(lán)色變?yōu)辄S色。

測定：用酶標(biāo)儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成正比。

關(guān)鍵實(shí)操技巧：

?1.加樣技巧

一次性換新槍頭，垂直貼孔壁低位加液；避免氣泡、飛濺交叉污染；整板加樣速度均勻統(tǒng)一。

2.溫育控溫

須37℃恒溫、封板膜嚴(yán)實(shí)防蒸發(fā)冷凝；時(shí)間嚴(yán)格卡死，過長背景高、過短信號(hào)低。

3.洗板核心

每孔注滿不溢出，浸泡≥30 s；拍干用無塵吸水紙，杜絕殘留；洗板不足直接高背景、假陽性。

4.樣本規(guī)范

杜溶血、脂濁、污染樣本；禁止反復(fù)凍融；嚴(yán)禁含 NaN?抑制 HRP 活性；濃度超標(biāo)只用試劑盒配套稀釋液。

5.顯色與讀數(shù)

全避光；整板顯色時(shí)長一致；加終止液立刻讀數(shù)，放置越久數(shù)值漂移越大。

公司正在出售的產(chǎn)品：

操作步驟?：

?1、試劑與樣本準(zhǔn)備?：

將試劑盒平衡至室溫（20-25℃），按說明書稀釋洗滌緩沖液（通常1:19）。

?標(biāo)準(zhǔn)品?：用梯度稀釋至0.313、0.625、1.25、2.5、5、10、20 ng/mL系列濃度。

?樣本?：血清、血漿或組織勻漿上清。若t-PA濃度高，可按說明書（如1:10）稀釋。

?2、加樣與孵育?：

每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本。

輕輕振蕩混勻，避免觸碰孔壁。

37℃孵育90分鐘（部分試劑盒可能為120分鐘，需以說明書為準(zhǔn)）。

?3、洗滌?：

棄去孔內(nèi)液體，用洗滌緩沖液加滿每孔，靜置30秒后甩干，重復(fù)5-6次。

4?、加檢測抗體與孵育?：

每孔加入100μL化抗豬t-PA檢測抗體。

37℃孵育60分鐘。

5?、再次洗滌?：

同步驟3，洗去未結(jié)合抗體。

6?、顯色?：

每孔加入90-100μL TMB底物混合液（A液+B液）。

37℃避光孵育10-15分鐘。

?7、終止與測定?：

每孔加入50μL終止液，立即混勻（顏色由藍(lán)變黃）。

在加終止液后15分鐘內(nèi)，用酶標(biāo)儀在450nm波長處測定各孔吸光度（OD值）。