產品簡介：
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測小鼠血清、血漿、組織勻漿及細胞提取物中的低氧誘導因子1α（HIF-1α）蛋白濃度。檢測范圍覆蓋0.313-20 ng/mL，靈敏度達0.16 ng/mL，適用于低氧應激、腫瘤血管生成、缺血再灌注損傷及缺氧相關疾病研究等領域。
產品名稱：小鼠低氧誘導因子1αelisa試劑盒
英文名稱：HIF-1α ELISA Kit
產品規格：48T/96T
產品貨號：CS-1149E
檢測原理：
小鼠低氧誘導因子1α(HIF-1α) elisa試劑盒的原理是雙抗體夾心法，通過固相載體捕獲抗原，再用酶標記的檢測抗體進行識別，最后通過底物顯色反應來定量檢測。
固相化：微孔板預先包被抗小鼠HIF-1α抗體。
結合：加入標準品或樣本，HIF-1α被固相抗體捕獲。
檢測：加入生物su化的抗小鼠HIF-1α抗體和HRP標記的親和素，形成"抗體-抗原-酶標抗體"復合物。
顯色：加入TMB底物，被HRP催化后由藍色變為黃色。
測定：用酶標儀在450nm波長測定吸光度(OD值)，濃度與OD值成正比。
實驗步驟?：
?試劑準備?：將試劑盒平衡至室溫(20-25℃)，洗滌緩沖液按1:19稀釋。標準品梯度稀釋至所需濃度。
?加樣?：每孔加入100μL標準品或樣本，37℃孵育90分鐘。
?洗滌?：棄去液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后甩干，重復5次。
?加檢測抗體?：每孔加入100μL檢測抗體-HRP，37℃孵育60分鐘。
?洗滌?：同步驟3。
?顯色?：每孔加入90μL TMB底物A+B混合液，37℃避光孵育15分鐘。
?終止?：每孔加入50μL終止液，立即搖勻（顏色由藍變黃）。
?檢測?：450nm波長測定吸光度(OD值)，15分鐘內完成。
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操作步驟?：
1.試劑提前室溫平衡 30 min，濃縮洗滌液按說明書稀釋配制。
2.設置空白孔、標準品孔、待測樣品孔，精準加樣后封板。
3.37℃恒溫孵育結合反應，結束后棄孔內液體拍干。
4.加滿洗滌液浸泡清洗，重復洗板 3–5 次，去除未結合雜質。
5.除空白孔外，每孔加入 HRP 酶結合物，再次 37℃溫育。
6.重復洗板流程洗凈游離酶標抗體，保證背景干凈。
7.依次加入顯色液避光顯色，待梯度藍色清晰顯現。
8.加入終止液終止反應，顏色由藍轉黃，即刻用酶標儀讀取 OD 值。
9.根據標準曲線擬合計算，得出樣本目
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