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產(chǎn)品簡介：

本試劑盒采用競爭法酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測小鼠血清、血漿中的 16α 羥基雌酮 1（16-α OHE-1）含量。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達(dá) 0.16 ng/mL，適用于雌激素代謝、乳腺疾病、內(nèi)分泌調(diào)控及腫瘤發(fā)生研究等領(lǐng)域。

產(chǎn)品名稱：小鼠16α羥基雌酮1elisa試劑盒

英文名稱：16-α OHE-1 ELISA Kit

產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T

產(chǎn)品貨號(hào)：CS-1431E

檢測原理：

小鼠 16α 羥基雌酮 1 (16-α OHE-1) elisa 試劑盒的原理是競爭法，通過固相載體包被抗原與樣本抗原競爭結(jié)合抗體，再用酶標(biāo)抗體識(shí)別，最后通過底物顯色反應(yīng)來定量檢測。

固相化：微孔板預(yù)先包被 16-α OHE-1 人工抗原。

結(jié)合：加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，樣本 16-α OHE-1 與固相 16-α OHE-1 競爭結(jié)合抗體。

檢測：加入酶標(biāo)特異性抗體，形成抗原抗體復(fù)合物。

顯色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化后由藍(lán)色變?yōu)辄S色。

測定：用酶標(biāo)儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成反比。

實(shí)驗(yàn)步驟?：

?試劑準(zhǔn)備?：將試劑盒平衡至室溫(20-25℃)，洗滌緩沖液按1:19稀釋。標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋至所需濃度。

?加樣?：每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，37℃孵育90分鐘。

?洗滌?：棄去液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后甩干，重復(fù)5次。

?加檢測抗體?：每孔加入100μL檢測抗體-HRP，37℃孵育60分鐘。

?洗滌?：同步驟3。

?顯色?：每孔加入90μL TMB底物A+B混合液，37℃避光孵育15分鐘。

?終止?：每孔加入50μL終止液，立即搖勻（顏色由藍(lán)變黃）。

?檢測?：450nm波長測定吸光度(OD值)，15分鐘內(nèi)完成。

公司正在出售的產(chǎn)品：

操作步驟?：

?1、試劑與樣本準(zhǔn)備?：

將試劑盒平衡至室溫（20-25℃），按說明書稀釋洗滌緩沖液（通常1:19）。

?標(biāo)準(zhǔn)品?：用梯度稀釋至0.313、0.625、1.25、2.5、5、10、20 ng/mL系列濃度。

?樣本?：血清、血漿或組織勻漿上清。若t-PA濃度高，可按說明書（如1:10）稀釋。

?2、加樣與孵育?：

每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本。

輕輕振蕩混勻，避免觸碰孔壁。

37℃孵育90分鐘（部分試劑盒可能為120分鐘，需以說明書為準(zhǔn)）。

?3、洗滌?：

棄去孔內(nèi)液體，用洗滌緩沖液加滿每孔，靜置30秒后甩干，重復(fù)5-6次。

4?、加檢測抗體與孵育?：

每孔加入100μL化抗豬t-PA檢測抗體。

37℃孵育60分鐘。

5?、再次洗滌?：

同步驟3，洗去未結(jié)合抗體。

6?、顯色?：

每孔加入90-100μL TMB底物混合液（A液+B液）。

37℃避光孵育10-15分鐘。

?7、終止與測定?：

每孔加入50μL終止液，立即混勻（顏色由藍(lán)變黃）。

在加終止液后15分鐘內(nèi)，用酶標(biāo)儀在450nm波長處測定各孔吸光度（OD值）。