產品簡介：
本試劑盒采用競爭法酶聯免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測小鼠血清、血漿、尿液、腦組織勻漿中的 5 羥基吲哚乙酸（5-HIAA）含量。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達 0.16 ng/mL，適用于 5 - 羥色胺代謝、神經精神疾病、情緒調控及胃腸功能研究等領域。
產品名稱：小鼠5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)elisa試劑盒
英文名稱：5-HIAA ELISA Kit
產品規格：48T/96T
產品貨號：CS-1404E
檢測原理：
小鼠 5 羥基吲哚乙酸 (5-HIAA) elisa 試劑盒的原理是競爭法，通過固相載體包被抗原與樣本抗原競爭結合抗體，再用酶標抗體識別，最后通過底物顯色反應來定量檢測。
固相化：微孔板預先包被 5-HIAA 人工抗原。
結合：加入標準品或樣本，樣本 5-HIAA 與固相 5-HIAA 競爭結合抗體。
檢測：加入酶標特異性抗體，形成抗原抗體復合物。
顯色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化后由藍色變為黃色。
測定：用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成反比。
實驗步驟?：
?試劑準備?：將試劑盒平衡至室溫(20-25℃)，洗滌緩沖液按1:19稀釋。標準品梯度稀釋至所需濃度。
?加樣?：每孔加入100μL標準品或樣本，37℃孵育90分鐘。
?洗滌?：棄去液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后甩干，重復5次。
?加檢測抗體?：每孔加入100μL檢測抗體-HRP，37℃孵育60分鐘。
?洗滌?：同步驟3。
?顯色?：每孔加入90μL TMB底物A+B混合液，37℃避光孵育15分鐘。
?終止?：每孔加入50μL終止液，立即搖勻（顏色由藍變黃）。
?檢測?：450nm波長測定吸光度(OD值)，15分鐘內完成。
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操作步驟?：
1.試劑提前室溫平衡 30 min，濃縮洗滌液按說明書稀釋配制。
2.設置空白孔、標準品孔、待測樣品孔，精準加樣后封板。
3.37℃恒溫孵育結合反應，結束后棄孔內液體拍干。
4.加滿洗滌液浸泡清洗，重復洗板 3–5 次，去除未結合雜質。
5.除空白孔外，每孔加入 HRP 酶結合物，再次 37℃溫育。
6.重復洗板流程洗凈游離酶標抗體，保證背景干凈。
7.依次加入顯色液避光顯色，待梯度藍色清晰顯現。
8.加入終止液終止反應，顏色由藍轉黃，即刻用酶標儀讀取 OD 值。
9.根據標準曲線擬合計算，得出樣本目標物質濃度。
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